参照文献方法，用氧嗪酸钾和尿酸腹腔注射小鼠。氨基连续2天，脲对造成小鼠高尿酸血症模型。黄嘌化酶雄性昆明种小鼠适应性饲养一周后，呤氧随机分成正常对照组、制作高尿酸模型组、用研别嘌呤醇组、肉桂肉桂醛缩氨基脲组、醛缩肉桂醛组共5组，氨基每组10只。脲对正常对照组和高尿酸模型组，黄嘌化酶每天按20mL/kg剂量灌胃生理盐水，呤氧持续6天。制作别嘌呤醇组每天按10mg/kg剂量灌胃1次，持续6天。肉桂醛组、肉桂醛缩氨基脲组小鼠每天按0.1g/kg剂量灌胃6天。从给药第5天开始，除正常对照组外，其他各组每天灌胃前1h均要腹腔注射0.3g/kg氧嗪酸钾和0.25g/kg尿酸，每天1次，连续2天进行造模。在第6天灌胃1h后，小鼠进行断头采血，血样分别置于1.5mL离心管中，在4℃冰箱中凝固2h，在4℃下3000r/min离心5min。每份血清进行血尿酸和血清XOD活性测定。采血后，取出肝脏，匀浆处理，离心取上清，测XOD活性。
用尿酸测定试剂盒测定血尿酸质量浓度,用试剂盒法测定小鼠血清XOD和肝脏XOD活性。
用SPSSl9.0软件进行统计分析，计量资料以平均值±标准偏差表示，组间比较用t检验。
化合物a(肉桂醛缩氨基脲，cinnamicaldehydesemicarbazone，CAS)：无色针晶(CH30H)；UV(MeOH)λmax308，306nm；IR(KBr)νmax3282，1644，1604cm-1；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)；δ10.174(s，1H，NH)7.653(s，1H，CH=N)，7.49(d，2H，Ph-H)，7.345(t，2H，Ph-H)，7.265(t，1H，Ph-H)，6.852(d，2H，CH=CH)，6.26(s，2H，NH2)；ESI-MS，m/z=189.23，[M+H]+(C10H11N30)。其IR、1H-NMR、ESI-MS数据与文献报道一致。
化合物b(肉桂醛缩氨基硫脲，cinnamaldehvdethiosemicarbazide，CT)：浅黄色菊花晶(CH30H)；UV(MeOH)λmax352，348nm；IR(KBr)νmax3262，1592cm-1；1H-NMR(400MHz，DMS0-d6)：δ11.350(s，1H，NH)，8.123(s，1H，CH=N)，7.859(d，1H，Ph-H)，7.539(d，2H，NH2)，7.541(d，1H，Ph-CH=)，7.341(t，3H，Ph-H)，6.998(d，1H，Ph-H)，6.838(q，1H，=CH-)；ESI-MS，m/zMr=205.3，[M+H]+(C10H11N3S)。其IR、1H-NMR、ESI-MS数据与文献报道一致。
化合物c(肉桂醛缩甲基氨基硫脲，cinnamaldehvdeshrinkagemethvlthiosemicarbazide，CSMT)：黄色粉末(CH30H)；UV(Me0H)λmax305，358nm；IR(KBr)νmax3362，1552cm-1；1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)：δ11.401(s，1H，NH)，8.24(s，1H，CH=N)，7.87(d，1H，CH=)，7.521(d，2H，Ph-H)，7.36(t，2H，Ph-H)，7.294(t，1H，Ph-H)，6.988(d，1H，CH=)，6.833(m，1H，NH)，2.942(d，3H，CH3)；ESI-MS，m/zMr=219.32，[M+H]+(C11H13N3S)。
化合物d(肉桂醛缩4-苯基氨基硫脲，cinnamaldehvdeshrinkagephenvlthiosemicarbazide，CSPT)：无色针晶(CH30H)；UV(MeOH)λmax305，350nm；IR(KBr)νmax3313，1594cm-1；1H-NMR(400MHz，DMS0-d6)：δ11.79(s，1H，NH)，9.89(s，1H，NH-Ph)，7.98(s，1H，CH=N)，6.96(dd，1H，=CH-)，7.05(d，1H，Ph-CH=)，7.15(d，1H，Ph-H)，7.35(m，5H，Ph-H)，7.58(dd，4H，Ph-H)；ESI-MS，m/zMr=281.39，[M+H]+(C16H15N3S)。其IR、1H-NMR、ESI-MS数据与文献报道一致。
肉桂醛及其席夫碱衍生物对XOD的抑制率见图2。其中各折线依次代表抑制剂别嘌呤醇、肉桂醛缩氨基脲、肉桂醛、肉桂醛缩苯基氨基硫脲、肉桂醛缩甲基氨基硫脲、肉桂醛缩氨基硫脲。由图2可知，同一种抑制剂，浓度越大，酶活性越低。别嘌呤醇、肉桂醛缩氨基脲、肉桂醛、肉桂醛缩苯基氨基硫脲、肉桂醛缩甲基氨基硫脲、肉桂醛缩氨基硫脲抑制XOD的IC50值分别是(7.05±0.14)、(55.48±0.54)、(90.93±0.72)、(122.48±0.65)、(201.29±0.88)、(241.57±1.32)μmol/L(n=3)。各化合物活性顺序是别嘌呤醇＞肉桂醛缩氨基脲＞肉桂醛＞肉桂醛缩苯基氨基硫脲＞肉桂醛缩甲基氨基硫脲＞肉桂醛缩氨基硫脲。
肉桂醛缩氨基脲对XOD抑制活性比肉桂醛强，且活性接近阳性药别嘌醇。肉桂醛缩氨基脲抑制XOD活性比肉桂醛缩氨基硫脲类化合物强，可能与氨基脲上的羰基能与XOD酶上的氨基酸残基形成氢键，而硫脲不能形成氢键有关。抑制XOD活性，苯基取代硫脲＞甲基取代硫脲＞硫脲。这可能与疏水性有关，苯基的疏水性最大，其次是甲基，然后是无取代基。即疏水性基团越大，抑制活性越好。由于肉桂醛缩氨基脲抑制XOD活性最强，以下测定抑制机理和抑制类型就只研究肉桂醛缩氨基脲。
在测活体系中，固定底物黄嘌呤浓度，改变XOD酶的质量浓度，测定不同浓度的抑制剂肉桂醛缩氨基脲(0、50、75、100μmol/L)对XOD酶活性的影响。由图3可知，以酶促反应的速度对酶质量浓度作图，为一组通过原点的直线，由此判断肉桂醛缩氨基脲对XOD抑制机理为可逆抑制。
相关链接：肉桂醛，黄嘌呤，尿酸，硫脲
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